Personaggi
Comandante Shepard - Il protagonista del primo capitolo della serie, viene ucciso nella sequenza iniziale di Mass Effect 2 per poi essere riportato in vita dall'organizzazione Cerberus, che gli fornisce una nave ed un equipaggio per fonteggiare la minaccia dei Collettori, una misteriosa razza aliena che sta rapendo intere colonie umane ed è sospettata di lavorare per i Razziatori.
Uomo Misterioso - Potente ed enigmatico, l'Uomo Misterioso è a capo dell'organizzazione Cerberus, un'oscura associazione che si batte per difendere gli interessi, quando non la supremazia, della razza umana nella galassia. Riporta Shepard in vita, finanziando il progetto Lazarus, e gli fornisce gli strumenti per fronteggiare la minaccia che i Collettori stanno portando contro le colonie umane. Shepard non parla con lui di persona, ma soltanto attraverso un'interfaccia olografica.
Jeff "Joker" Moreau - Brillante e sarcastico pilota della Normandy SR-1, aiutò Shepard nella sua lotta contro Saren e i Razziatori. Dopo la distruzione della nave, la squadra di Shepard fu sciolta e Joker decise di lasciare l'Alleanza per unirsi a Cerberus. In Mass Effect 2 è nuovamente ai comandi della nave di Shepard, la Normandy SR-2.
IDA: EDI nella versione originale, è l'intelligenza artificiale installata a bordo della Normandy SR-2.
Compagni di squadra
Rispetto al primo capitolo della serie, il numero dei compagni di squadra reclutabili sale da 6 a 12. A ciascuno di essi è associata una loyalty mission, una quest in cui richiederanno aiuto per risolvere questioni personali; portare a termine tale missione sbloccherà un'abilità speciale per il compagno di squadra ed aumenterà le sue chance di sopravvivenza alla missione finale. Tra i compagni di squadra conosciuti in Mass Effect, solo il turian Garrus e la quarian Tali seguiranno il protagonista anche in questo secondo capitolo.
Jacob Taylor - Un biotico con un passato nell'esercito dell'Alleanza, Jacob si è unito a Cerberus stanco dell'eccessiva burocrazia cui da soldato doveva far fronte. Tra i pochi sopravvissuti all'attacco geth su Eden Prime, rispetta Shepard per il comune passato da militari. Sebbene condivida gli scopi di Cerberus, non necessariamente ne approva i metodi.
Miranda Lawson - Geneticamente modificata per volere di suo padre, Miranda Lawson è l'ufficiale di Cerberus più alto in grado a bordo della Normandy e il secondo in comando di Shepard. Biotica, è pienamente devota alla causa di Cerberus, pronta a tutto affinché la sua organizzazione raggiunga i suoi scopi.
Mordin Solus - Un brillante scienziato salarian, già membro della Squadra Operazioni Speciali, Mordin Solus viene reclutato sulla stazione Omega e possiede una personalità eccentrica e iperattiva. Faceva parte del team di ricerca salarian che si occupò della genofagia e sovraintende alla attività scientifiche a bordo della Normandy SR-2.
Samara - Una Justicar, ossia un'asari che ha scelto di lasciarsi alle spalle la propria vita e i propri cari per seguire un ideale di giustizia. Potentissima biotica, vaga per la galassia per giustiziare criminali e vendicare torti, e non permette a nessuno di interferire con le sue azioni. Sebbene il codice delle Justicar le conceda totale arbitrio sulla vita degli altri, respinge decisamente qualunque forma di violenza ingiustificata.
Morinth - Figlia di Samara, è un Ardat-Yakshi, un'asari che a causa di un'anomalia genetica è in grado di uccidere il proprio partner nel momento in cui si unisce ad esso e per questo motivo è inseguita dalla madre per tutta la galassia. Il suo reclutamento, alternativo a quello di Samara, è subordinato alle scelte del giocatore.
Garrus Vakarian - Dopo la distruzione della Normandy SR-1, il turian Garrus Vakarian, insofferente alla burocrazia, abbandona il Servizio di Sicurezza della Cittadella per darsi alla vita del vigilante. Raggiunge la stazione Omega, mette insieme una squadra e si dedica autonomamente a combattere il crimine, attirandosi l'ostilità delle organizzazioni criminali presenti sulla stazione. A seguito di un tradimento, la sua squadra viene annientata e Shepard lo recluta a bordo traendolo da una situazione piuttosto intricata.
Grunt - Un prototipo di supersoldato krogan creato dal signore della guerra Okeer. Allevato secondo il retaggio, le memorie e le abilità dei grandi guerrieri del passato, Grunt è considerato uno degli esemplari più avanzati e puri della sua specie. Tuttavia, almeno inizialmente non possiede un clan ed ha un scarsa conoscenza dei costumi e delle tradizioni krogan, il che lo porta ad agire spinto unicamente dai propri ancestrali istinti.
Thane Krios - Un assassino drell, Thane ha la sindrome di Kepral e si unisce alla causa di Shepard in cerca di uno scopo da dare agli ultimi giorni della sua esistenza. È una sorta di monaco-guerriero, stoico e spirituale, ardentemente devoto al proprio cammino religioso. Sebbene un tempo fosse un mercenario che si offriva al miglior offerente, gli eventi della sua vita lo hanno portato ad accettare gli incarichi basandosi esclusivamente suoi propri principi morali e religiosi. All'abilità con le armi da fuoco unisce quelle da biotico.
Jack (Soggetto Zero) - Prodotto di un oscuro esperimento di Cerberus, Jack è una potente quanto violenta biotica umana, con il corpo ricoperto da tanti tatuaggi quanti sono gli uomini che ha ucciso. Ha fatto parte di un culto e di diverse gang ed ha commesso una lunga serie di crimini, nel vano scopo di definire se stessa. Pericolosa ed instabile, è reclusa nella nave-prigione Purgatory.
Tali'Zorah vas Neema/Normandy - Dopo la distruzione della Normandy SR-1, l'ingegnere quarian Tali'Zorah nar Rayya ritorna a bordo della Flotta Migrante e si unisce all'equipaggio della nave Neema. Nota per le sua abilità tecniche e ingegneristiche, è un importante e rispettato membro della Flotta. Assalita dai geth durante una spedizione scientifica, viene tratta in salvo da Shepard e nuovamente reclutata nel suo equipaggio.
Legion - Legion è un geth che Shepard porta a bordo, disattivato, in seguito ad una missione della storyline principale, con l'opzione di spedirlo a Cerberus o di riattivarlo. Se il giocatore sceglie la seconda opzione, il geth, denominato Legion dall'IA della Normandy, si unirà alla squadra e fornirà una prospettiva del tutto nuova sulla propria specie.
Zaeed Massani - Mercenario umano, Zaeed Massani servì nell'Alleanza prima di costruirsi la reputazione di uno dei più feroci e brutali cacciatori di taglie dei Sistemi Terminus. Viene reclutato a caro prezzo da Cerberus per la missione di Shepard. Privo di qualsivoglia coscienza o principio morale, è il segreto co-fondatore dell'organizzazione mercenaria dei Sole Blu. Personaggio ottenibile tramite DLC.
Kasumi Goto - La ladra più abile e misteriosa della galassia, di Kasumi Goto si conosce poco, tranne il fatto che Cerberus l'ha reclutata per aiutare Shepard nella sua missione contro i Collettori. In cambio, chiede aiuto nell'infiltrarsi nel caveau di un pericoloso criminale per risolvere alcune questioni affettive. Personaggio ottenibile tramite DLC.
Classi
In Mass Effect 2 vi sono 6 diverse classi disponibili, che ricalcano quelle già presenti in Mass Effect.
Adepto: È uno specialista biotico in grado di aver ragione di un gran numero di nemici senza sparare un solo colpo. È l'unica classe che dispone del potere Singolarità, con cui infligge un devastante danno ad area. È in grado di sollevare nemici nascosti dietro un riparo o di scagliarli violentemente contro le pareti. Può usare pistole pesanti e mitra.
Ingegnere: È uno specialista tecnico, in grado di dispiegare droni da combattimento sul campo di battaglia. Può violare l'IA dei nemici sintetici per indurli ad attaccare i loro alleati e possiede le abilità Incenerimento e Sovraccarico, con cui può recare danno ad una vasta gamma di nemici. È addestrato all'uso di pistole pesanti e mitra.
Soldato: Equipaggiato con un processore sinaptico oculare che gli consente di concentrarsi sui nemici con grande efficacia, il Soldato è una classe tenace e resistente, addestrata a fronteggiare i nemici mediante l'utilizzo delle armi da fuoco. È l'unica classe a disporre dei fucili d'assalto e di tutti i tipi di munizioni. Può usare ogni tipo di arma da fuoco.
Incursore: Specialista sia militare che tecnico, è l'unica classe che possiede l'abilità Occultamento Tattico, con la quale può celarsi agli occhi dei nemici e ai sensori degli strumenti di rilevazione. Letale a qualunque distanza, è addestrato all'uso di fucili di precisione, pistole pesanti e mitra.
Sentinella: Classe a metà tra Adepto e Ingegnere, è piuttosto versatile e in grado di fronteggiare qualunque situazione. Può sovraccaricare gli scudi dei nemici per poi finirli con le abilità biotiche e possiede una corazza tecnologica che lo protegge dal fuoco nemico; se sovraccaricata, stordisce tutti i nemici a corto raggio. Può usare pistole pesanti e mitra.
Ricognitore: Specialista biotico e militare, possiede uno stile di combattimento rischioso ma letale, in base al quale stordisce i nemici con i propri poteri biotici per poi avvicinarsi alla portata delle proprie armi a corto raggio. È addestrato all'utilizzo di fucili a pompa, pistole pesanti e mitra.